内容

目次

第 I 部　cDNAクローニングの原理　1．mRNAの分離と精製　1.1　RNAの抽出　1.2　RNAからの多糖類の除去　1.3　オリゴ(dT)カラムによるmRNAの精製　1.4　RNAの電気泳動／2．cDNAの合成　2.1　溶液の交換　2.2　逆転写酵素によるcDNAの合成　2.3　2本鎖cDNAの合成　2.4　ランダムプライマーを用いたcDNAの合成／3．cDNAライブラリーの作製　3.1　バクテリオファージベクター　3.2　バクテリオファージベクターへの組込み　3.3　組換えファージDNAのウイルス化／4．バクテリオファージのクローン化　4.1　スクリーニングプレートの作製　4.2　プローブの合成　4.3　ブロッティング　4.4　メンブレンのブロッキング　4.5　ハイブリダイゼーション　4.6　プローブの検出　4.7　cDNAのクローニング　4.8　発現ベクターライブラリーのスクリーニング　4.9　クローンファージの回収とDNAの抽出／第 II 部　基本的な実験操作の原理　5．プラスミドベクターへのサブクローニング　5.1　コンピテントセル　5.2　プラスミドベクターへの組換え　5.3　大腸菌の形質転換操作　5.4　コロニーからのプラスミドの回収／6．電気泳動　6.1　DNAゲル電気泳動　6.2　核酸の染色と検出　6.3　アガロースからのDNAの回収　6.4　塩基配列の解析／7．PCR　7.1　PCR　7.2　PCRを利用した遺伝子のクローニング／8．ハイブリダイゼーション　8.1　プローブの作製　8.2　サザンハイブリダイゼーション　8.3　ノザンハイブリダイゼーション　8.4　insitu ハイブリダイゼーション／9．制限酵素と宿主大腸菌　9.1　制限酵素を利用する遺伝子組換え操作　9.2　遺伝子操作に用いられる大腸菌株の遺伝子型／第 III 部　応用的な実験操作の原理／10．PCRの応用　10.1　PCRを利用した全長cDNAの単離　10.2　PCRを応用した変異の導入と組換え　10.3　PCRを応用した遺伝子発現の定量／11．cDNAを用いたタンパク質合成　11.1　組換えタンパク質合成に用いられるプラスミドの構造　11.2　cDNA組換えタンパク質合成／12．ゲノムの解析　12.1　ゲノム解析のためのDNA抽出　12.2　リプレイスメントベクター　12.3　BACベクター　12.4　BACクローンのスクリーニング／13．遺伝子発現の解析　13.1　目的のcDNAを網羅的に得る方法　13.2　真核細胞への遺伝子導入法　13.3　転写調節領域の解析　13.4　転写因子の検出と結合配列の解析